布鲁克公司研制出首台定量超分辨平台
位于马萨诸塞州的Bruker公司,一直以制造分子研究科学仪器著称,最近宣称其研制出最新超高分辨显微镜平台。
在美国细胞生物学学会2015年年会上,Bruker公司的Vutara 352显微镜正式面市,作为“世界上唯一的一台定量超高分辨率显微镜”而大放异彩。据称此款快速超高分辨率单分子定位(SML)显微镜将会面向市场销售。
根据公司介绍,系统最多支持五种激光光源,在x、y轴方向能够达到20nm的分辨率,在z轴方向能够达到50nm的分辨率。该套系统研发用于给纳米显微镜提供3D分辨率,为之在活细胞中提供识别、跟踪并量化荧光剂的功能。
公司荧光显微镜业务部门的Stephen Minne介绍,“单分子定位技术是通过一系列离散的分子级图像来进行图像的重构,技术独特。不同于其它任何超分辨率系统,Vutara 352显微镜系统充分利用了自身算法上的优势,使得研究人员在生物实验中能够立刻获进行定量分析。”
该公司的3D成像利用其专有的“双平面成像”技术,用来将三维信息转换成二维高分辨率图像。
在Vutara 352系统中,双平面技术用在Bruker的“定量”计算软件中,用来检测来自两个不同焦平面的荧光点扩散函数的组合。据公司介绍,这种方法能够通过统计光子数,在轴向上提高定位精度,而且不损失光子。
相关成像技术新进展
新系统能够与Bruker的Opterra SR共焦扫描仪协同工作,用于给固定的或者活的细胞样本成像。这种方法允许以相关成像的方式以最大限度收集信息,包括共聚焦和超分辨方法。
犹他大学的Robert Hobson介绍说,“共聚焦成像的快速卷积为我们清晰的实验样品提供了高分辨率成像。通过加入定量分析工具,我们能够解决更加详细的实证问题并得到更加详细的结果。”
Vutara成立于2009年,最初是从犹他大学分离出来,它们在3D超分辨上做出了杰出的工作,2014年7月被Bruker公司收购。
当时Bruker宣称,Vutara的超分辨技术将会给公司现有多光子显微镜和多点扫描光学显微系统带来新的突破点,在此之后就出现了Vutara 352系统。
单分子定位技术在超高分辨显微镜技术中扮演者重要的角色,多位研究人员以其在单分子定位技术上的开创性工作共享了2014年诺贝尔化学奖。该技术每次都以低于标准衍射极限的水平激活荧光团,在它们失去活性之前移动它们到别的位置。通过多次重复上述步骤以激活所有的荧光团,能够达到传统显微镜获取不到的分辨率。