色素是烟草中的重要组成成分, 烟草的外观质量和内在品质都与色素相关。 色素主要分为绿色素、 黄色素和黑色素。 在生长期, 烟草中的绿色素主要是叶绿素, 成熟期的烟草中黄色素则主要为叶黄素和胡萝卜素, 黑色素则存在于成熟的烟叶中, 或在调制和发酵的过程中产生。 色素的检测对于烟草原料评价和成品质量都非常重要。 鉴于烟草色素基于液相色谱的传统检测方法耗时较长、 样品制备过程复杂, 以及拉曼光谱操作简单、 测定时间短、 能提供有关分子官能团信息的特点, 开发了一种应用拉曼光谱同时定量检测烟草中叶黄素和β-胡萝卜素的快检方法。 烟草样品的有机溶剂提取物, 密封在透明玻璃瓶中, 将激光聚焦于瓶内溶液样品直接测定拉曼光谱。 研究发现, 不同于常见的514和785 nm激发波长, 在短波455 nm激光作用下, 可获得更理想的拉曼信号, 光谱强度较高, 荧光干扰较低。 对色素萃取溶剂、 焦平面与光学平台间的距离等实验条件进行了优化。 考虑到不同检测日期仪器操作条件的变化可对拉曼光谱产生影响, 以溶剂峰为内标峰, 对光谱进行归一化处理, 以校正因测定条件不稳定而引起的物理干扰。 为了解决荧光干扰, 以及色素分子之间的拉曼光谱干扰问题, 采用偏最小二乘法(PLS)建立光谱分析的多元校正模型。 建模中对波长区域以及光谱预处理方法进行了优化。 研究结果表明, 光谱归一化处理显著降低了因物理因素产生的光谱干扰, 光谱求导运算对建模影响不大, 而波长选择能明显改善模型的预测能力。 利用798.2～1 752.8 cm-1波段建立叶黄素的PLS定量模型时, 预测效果最佳, 预测集的均方根误差(RMSEP)为6.68 μg·g-1; 对于β-胡萝卜素, 798.2～1 752.8 cm-1组合2 254.2～2 784.5 cm-1用来建模时得到的RMSEP最小, 为2.56 μg·g-1。 该方法操作简便、 耗时少、 结果准确可靠, 为烟草样本中色素的定量分析提供了一种切实有效的新途径。