基于 Nrf2/HO-1/NLRP3通路探究雪莲果提取物治疗四氯化碳( CCl4)致急性肝损伤( ALI)大鼠的保护作用及机制。选取 48只健康雄性 SD大鼠, 随机分为 6组, 分别为对照组、模型组、雪莲果低中高剂量组和水飞蓟素阳性组。利用 CCl4构建急性肝损伤模型后处死大鼠取材, 检测大鼠血清和肝脏生化指标, 利用 HE染色观察各组肝脏组织病理学改变情况；利用 ELISA检测大鼠血清中炎症因子 IL-6、TNF-α、IL-1β的表达水平；采用蛋白免疫印迹法测定大鼠肝组织中 Nrf2/HO-1/NLRP3通路关键基因蛋白含量表达情况。结果表明: 与正常对照组比较, 模型组大鼠血清中 AST、ALT、ALP、γ-GT、MDA、IL-6和 TNF-α的表达水平均显著升高( P<0.05或 P<0.01)；肝脏组织中 SOD和 GSH的表达水平均显著降低( P<0.05), 大鼠肝组织细胞出现明显的病理性损伤( P<0.05)；与模型组比较, 雪莲果提取物能够呈剂量依赖性降低大鼠血清中 AST、ALT、ALP、γ-GT、IL-6和 TNF-α的表达水平( P<0.05或 P<0.01), 以及提高肝脏组织中 SOD、CAT、GSH和降低 MDA的表达水平( P<0.05), 大鼠肝组织病变程度明显改善, 肝脏内细胞坏死和肿胀程度明显减轻, 炎症细胞浸润得到显著改善。水飞蓟素阳性组能够显著改善大鼠肝损伤( P<0.05或 P<0.01)。雪莲果提取物组与模型组比较, Nrf2、GCLC、NQO1和 HO-1蛋白表达水平呈剂量依赖性升高( P<0.05或 P<0.01)；NLRP3炎症小体相关蛋白( NLRP3、Caspase1、GSDMD和 IL-18)表达水平呈剂量依赖性降低( P<0.05或 P<0.01)。雪莲果提取物对 CCl4所致的大鼠急性肝损伤具有保护作用, 该作用可能与调节 Nrf2/ HO-1通路改善氧化应激, 降低脂质过氧化, 清除大鼠体内自由基, 抑制 NLRP3炎症小体的功能, 减少炎症因子的合成与释放以及降低炎症反应有关。

本试验以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为材料, 研究玫瑰花提取物(RE)对砷胁迫下酵母细胞生长和凋亡的影响。试验以抗坏血酸(Vc)溶液为标准抗氧化对照物, 1.0 mmol/L亚砷酸钠(As)为酵母胁迫浓度, 分别设置了酵母对照组、酵母+RE(1.5 g/L)培养组、酵母+Vc(0.1 g/L)培养组、酵母+As(1.0 mmol/L)培养组、酵母+As+RE培养组和酵母+As+Vc培养组。酵母细胞培养24 h后, 利用噻唑兰(MTT)细胞增殖法、平板点样法、荧光素二乙酸/碘化丙锭(FDA/PI)染色法、4', 6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)细胞核染色法和Annexin V-FITC/PI细胞凋亡流式检测法测定了酵母细胞的生长增殖与凋亡。试验结果显示, RE有效地缓解了砷对酵母细胞的损伤, 极显著提高了砷胁迫下酵母细胞的生长率和存活率(P<0.01), 极显著抑制了砷胁迫下酵母细胞的凋亡(P<0.01)。结果证实, RE对砷胁迫酵母细胞的凋亡有显著抑制作用, 在50%的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率下, 其对砷胁迫下酵母细胞的凋亡抑制率显著高于Vc(P<0.05)。因此, RE作为天然植物提取物, 因其绿色、无毒的作用机制, 将在对抗重金属污染、提高机体抗氧化力、缓解氧化损伤等方面有着更广阔的应用前景。

比较两种荧光探针异硫氰酸荧光素FITC和Cy5标记鹿茸提取物PAEs的最佳方法。用FITC和Cy5分别标记PAEs得到标记物FITC-PAEs和Cy5-PAEs; 用SDS-PAGE凝胶电泳检测并比较两种荧光染料标记蛋白分子量的差异; 用酶标仪检测在特定波长处OD值计算其标记率; 用PC12细胞验证两种荧光染料的生物安全性; 将荧光标记物分别与人工胃液和人工肠液共孵育，观察它们在其中的稳定性。结果表明，两种荧光染料标记PAEs蛋白分子量并无明显差异，但FITC-PAEs荧光强度稍强。通过计算标记率表明两种荧光染料均可充分标记PAEs，但Cy5价格昂贵。相比于FITC-PAEs，Cy5-PAEs在人工胃液和人工肠液中稳定性较差。因此，我们选择标记率高，在人工胃液和人工肠液中较为稳定且对机体无毒副作用，价格合理的FITC荧光染料标记PAEs并用于后续实验研究。这为建立蛋白类中药大分子的活性示踪方法，开发口服蛋白类药物奠定基础。

运用红外光谱法对铁皮石斛、 金钗石斛、 鼓槌石斛及其两种提取物所含化学成分的红外谱图整体变化规律进行解析和鉴定。 采用傅里叶变换红外光谱对三种石斛及其提取物进行结构分析及鉴别。 原药材粉末一维红外光谱图反映出铁皮石斛、 金钗石斛和鼓槌石斛均含有2 920, 2 852, 1 737和1 509 cm-1附近的特征峰; 1 000~1 200 cm-1波段内的特征峰, 推测三种石斛均含有脂类、 芳香类和淀粉类成分。 二阶导数谱进一步佐证了以上结果。 根据峰强来判断三种石斛所含化合物含量的差别, 得出铁皮石斛和金钗石斛中的脂类和淀粉类成分含量较鼓槌石斛高, 三者中以金钗石斛的脂类成分、 铁皮石斛的多糖成分含量较高。 三种石斛原药材粉末二阶导数光谱中观察到1 318和782 cm-1处草酸钙的吸收峰。 三种石斛的两种提取物中的成分种类和含量与其原药材均有所不同, 且不同种石斛之间也存在峰形、 峰位、 峰强的差别。 在水提醇沉提取物、 无水乙醇提取物中均发现油脂类、 芳香类和多糖类成分的特征吸收峰。 与标准品比对分析发现, 金钗石斛和鼓槌石斛的多糖成分以淀粉为主, 而铁皮石斛则以黏多糖为主; 三种石斛无水乙醇提取物的红外光谱分析更清楚地发现脂类成分和芳香类成分的存在, 且脂类成分以金钗石斛提取物的含量相对较高。 芳香类成分以鼓槌石斛提取物的含量相对较高, 红外光谱整体结构解析与鉴定方法能够递进式地验证铁皮石斛、 金钗石斛和鼓槌石斛所含物质结构和量的差异, 适合于不同种石斛的快速鉴别及质量评价与控制。

自由基存在于人体和卷烟烟气中, 会引起人体病理反应和氧化损伤, 种类和形态多样, 如: O-·2, HO·, R·, RO·, ROO·。 电子顺磁共振法(EPR)是检测和定量分析自由基的重要方法之一。 银杏叶提取物(EGB)是由黄酮、 内酯、 原花青素类成分组成的植物药, 具有较好清除自由基和抗氧化能力。 本文以槲皮素、 芦丁、 原花青素等化合物为对照, 运用EPR法结合自旋捕集技术研究EGB和EGB卷烟对DPPH, HO·, O2-·、 烟气气相自由基、 烟气粒相自由基的抑制水平。 结果表明, EGB能够有效抑制化学/生物系统和卷烟烟气产生的自由基。 尽管抑制自由基整体水平比黄酮单体和原花青素弱, 但EGB提取方法简单容易得到, 可作为天然抗氧化剂和自由基清除剂用于食品和烟草等行业。 EPR法灵敏度高, 稳定性好, 是用于自由基研究的可靠方法。 捕集剂DEPMPO捕集O2-·更加高效, PBN捕集烟气气相自由基比DMPO更有优势。 该研究讨论了EGB清除自由基的机理, 丰富的酚羟基结构是其抗氧化作用的主要原因。

将净分析信号概念引入多元复杂的银杏叶提取物分析中, 利用净分析信号算法对近红外光谱图进行处理, 并用净分析算法结合二维相关光谱算法对模型进行了优化, 最终建立槲皮素、 山柰素和异鼠李素三种组分同时测定的近红外定量模型。 利用两种净分析信号算法(Lorber的NAS算法和Goicoechea 与 Olivieri的HLA/GO算法)作为光谱预处理方法, 用一系列主因子重构后的光谱图建立校正模型, 并通过净分析信号-二维相关光谱算法对图谱中主对角线处的波段进行选择, 优化模型建立所采用的波段。 所采用的两种基于净分析信号的预处理方法成功的应用于银杏叶中三种黄酮: 槲皮素, 山奈素和异鼠李素含量的同时测定。 净分析信号预处理方法显著降低了建模所需主因子数, 提高模型的稳健性。 净分析信号-二维相关光谱算法能够优化建模波段, 提高模型的预测能力。 结论: 净分析信号算法能够应用于近红外光谱模型预处理和优化过程, 在复杂多组分且干扰未知植物药含量分析的研究中具有实际应用价值。

糖尿病引起患者全身多部位发生慢性并发症, 严重危害患者的生命安全, 成为其致死致残的主要原因。 糖尿病患者体内的高血糖环境引发的组织内氧化应激反应增加是糖尿病并发症的重要发病机制之一, 而蛋白非酶糖基化反应和脂质过氧化反应过程与氧化应激密切相关。 从糖尿病并发症的发病机理出发, 以氧化应激为基点, 运用光谱法对17种中药提取物抗氧化应激反应的活性进行综合考察。 利用大鼠肝脏体外脂质自氧化反应结合紫外光谱法对中药提取物抑制脂质过氧化反应的能力进行评价, 中药黄芩和槐米具有较强的抑制活性, 富含黄酮类、 生物碱类及木脂素类提取物表现出较好的脂质过氧化反应抑制作用, 而皂苷类成分的活性相对较弱。 以牛血清白蛋白/葡萄糖(果糖)体系为糖基化筛选模型, 利用荧光光谱法对体外避光孵育反应体系进行研究, 中药槐米、 黄芩和知母表现出了较强的非酶糖基化反应抑制能力。 由17种中药提取物抗氧化应激反应的结果分析, 富含黄酮类成分中药的抗氧化应激作用强于生物碱类、 木脂素类和萜类的, 皂苷类中药的活性相对较弱; 而体外综合活性较好的中药槐米和黄芩可作为下一步研究的主要对象。 本研究为进一步的药理活性研究提供了一定的理论指导, 为开发防治糖尿病并发症的中药新药奠定基础。

利用红外光谱三级鉴定方法对藏药川西獐牙菜及其不同溶液提取物进行分析研究。 选择川西獐牙菜中含量相对较高的药用成分龙胆苦苷作为不同溶液提取物的对照成分进行红外光谱和二阶导数光谱的分析; 同时对不同浓度乙醇提取物进行二维相关光谱分析。 结果显示, 龙胆苦苷红外光谱中1 611和1 075 cm-1处的两个主要特征峰强度的变化趋势, 和川西獐牙菜不同溶剂提取物中龙胆苦苷含量变化趋势一致; 提取溶剂极性相近时, 提取物的红外光谱图相似; 随着提取溶液极性的逐渐降低, 提取物的红外谱图中2 853, 1 733, 1 464, 1 277和1 161 cm-1等处吸收峰强度逐渐增强, 提取物中酯类化合物含量逐渐增加, 萜类化合物的提取率逐渐增加; 红外光谱图极为相近的不同浓度乙醇提取物在二维红外光谱图中有很明显的差异。 龙胆苦苷特征峰强度的变化趋势和不同提取物中龙胆苦苷含量变化趋势的一致性说明红外光谱分析结果能体现分析对象中所含有成分的含量变化; 川西獐牙菜原药材, 水提物和不同浓度乙醇提取物谱图的相似性和相似度的变化规律, 说明传统用药水煎液和低浓度醇提物的科学性; 红外光谱技术可成为川西獐牙菜不同提取物后期药理活性成分宏观控制, 和多以复方入药的藏药研究中准确、 快速、 有效的分析方法。