1 第四军医大学西京骨科医院, 陕西 西安 710032
2 西安交通大学生命科学与技术学院, 陕西 西安 710032
应用Allen造模法制备大鼠急性脊髓损伤(SCI)模型，研究弱激光照射对损伤脊髓组织内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)表达的影响。68只SD大鼠随机分为正常组、SCI组和照射组，照射组应用810 nm弱激光经皮照射相应的脊髓损伤节段。分别于术后1 d、3 d和7 d进行BBB评分；1 h、3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、5 d和7 d取材，酶联免疫吸附检测(ELISA)法检测受损脊髓组织内TNF-α、IL-6和IL-10的表达情况。实验发现，照射后7 d照射组大鼠BBB评分高于SCI组，且有统计学意义（P<0.05）；与SCI组相比，照射组受损脊髓组织内TNF-α和IL-6的表达量均降低，且在术后6 h、12 h、1 d（TNF-α）和6 h、12 h、5 d（IL-6）差异有统计学意义（P<0.05）；IL-10的表达量在各个时间点均增高，且在术后1 d、3 d、5 d和7 d差异有统计学意义（P<0.05）。结果表明弱激光照射能明显抑制脊髓损伤早期前炎症因子TNF-α和IL-6的表达，促进抑炎因子IL-10的表达，促进损伤后期大鼠运动功能的恢复。
医用光学 弱激光照射 脊髓损伤 肿瘤坏死因子α 白介素-6 白介素-10
华东师范大学生命科学学院生命医学研究所, 上海 200241
NF-κB已被证明在肿瘤和炎症过程中起到至关重要的作用。因此, 建立抑制NF-κB信号通路的药物筛选模型至关重要。利用荧光素酶报告基因技术与蛋白印迹技术分别探索TNFα处理浓度及时间对NF-κB报告基因表达和NF-κB抑制亚单位IκBα降解的影响, 进而构建NF-κB信号通路抑制剂药物筛选模型。实验结果表明, 0.01 nmol/L TNFα作用24 h即能刺激HEK293T细胞中NF-κB报告基因较高水平的表达, 且其表达量与TNFα的剂量和处理时间呈正相关性; 0.01 nmol/L TNFα作用5 min即能使Panc-28细胞中IκBα明显降解, 20 min~30 min几乎降解完全, 之后IκBα含量又开始增加。NF-κB阳性抑制剂藤黄酸验证表明NF-κB萤光素酶报告基因检测筛选体系和NF-κB抑制亚单位降解筛选体系两种体系稳定可行。结果证明, 两种模型可以用于NF-κB信号通路抑制剂药物的筛选。
药物筛选模型 藤磺酸 NF-κB NF-κB drug screening model TNFα TNFα IκBα IκBα gambogic acid
1 华南师范大学,信息光电子科技学院光子中医学实验室,广东,广州,510631
2 华南师范大学,激光生命研究所,广东,广州,510631
3 广州中医药大学热带病研究所,广东,广州,510407
在骨关节疾病中,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)对关节软骨缺损的机理扮演着重要的角色.为了进一步明确低强度激光在关节软骨缺损中的治疗作用,应用细胞因子IL-1β与TNF-α刺激培养SW 1353细胞复制炎症细胞模型,观察发光二极管(LED)照射对培养细胞的生存率和死亡率的影响、细胞活性的影响、以及对MMP-3和MMP-13的调节作用.实验结果显示,10 μg/L IL-1 β与20 μg/L TNF-α对培养细胞生存率无明显影响,而细胞活性明显下降(P＜0.01),培养液中MMP-3和MMP-13含量明显上升(P＜0.01,P＜0.05);LED照射后可见与相应的模型组比较细胞死亡率下降(P＜0.01)、培养液中MMP-3和MMP-13含量显著性降低在(P＜0.01,P＜0.05).研究表明,LED照射对炎症因子刺激的SW 1 353细胞的MMP过多表达具有抑制性作用,可能对于关节软骨缺损性疾病的LED照射治疗起一定的指导意义.
基质金属蛋白酶 软骨细胞 SW1353细胞 IL-1 TNF-α LED
