采用多种光谱法及计算机模拟技术研究了298, 303, 310 K温度下, 头孢他美酯(CFP)与胃蛋白酶(PEP)之间的结合机理。结果表明, CFP主要以非辐射能量转移的静态猝灭方式猝灭PEP的荧光, 两者主要通过静电作用力结合, 其结合率在310 K为74.73%~92.13%。采用同步荧光法和圆二色谱法研究CFP对PEP的反应, 结果表明两者的结合诱导了PEP的构象变化, 使PEP的内源荧光猝灭。采用计算机模拟CFP与PEP的对接, 结果表明CFP结合在PEP的催化活性位点处, 该结论与光谱法所得结果一致。利用CFP对PEP的荧光猝灭反应, 可以实现对实际药品中CFP含量的快速测定。

分别在298，310，318 K温度下，利用荧光光谱法研究了pH=7.40生理条件下硝基羟乙唑(TRI)与溶菌酶(LYSO)的相互作用机理。结果表明，TRI与LYSO间通过静态猝灭方式相互作用。测定了LYSO与TRI反应的结合常数、结合位点数。利用反应过程的热力学参数，确定了LYSO-TRI体系的作用力类型；由Hill系数得出了LYSO或TRI的协同性;根据非辐射能量转移理论，确定了TRI到LYSO的结合距离，同时采用同步光谱法考察了TRI对LYSO构象的影响。

利用荧光猝灭法和同步荧光法进行了盐酸吡格列酮(PGH)与牛血清白蛋白(BSA)之间反应机理的比较研究.结果表明：两种方法在研究PGH-BSA体系的猝灭类型、结合常数、结合位置、作用力类型、协同性及能量转移距离等方面,得到了相同的结果,表明同步荧光光谱法可以用于药物与蛋白反应机理的研究.

在Tris-HCl缓冲溶液(pH=7.4)中, 分别研究了莫西沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、洛美沙星、环丙沙星与牛血清白蛋白的相互作用, 利用计算药物小分子与蛋白结合常数的常用方程: Scatchard修正方程、Lineweaver-Burk双倒数方程、双对数方程、修正的Stern-Volmer方程、改进的双对数方程, 分别计算了各沙星药物与蛋白的结合常数和结合位点数。对计算结果进行比较, 结果表明对于药物与蛋白为1∶1的结合反应, 除Scatchard修正方程外其他方程的计算结果十分接近, 其中改进的双对数方程的计算结果更加合理准确。

在pH 740 的Tris-HCl缓冲溶液中, 利用以蛋白荧光变化为考察对象的传统荧光光谱法和以药物荧光变化为考察对象的弹性散射荧光法, 分别研究了293和303 K温度下格列吡嗪(Gli)与牛血清白蛋白(BSA)之间的反应机理, 两种方法所得结论均一致。 即Gli与BSA之间猝灭方式为动态猝灭; 两者主要通过疏水作用力结合, 结合位点主要位于BSA的疏水区, 结合位点数约为1; Hill系数nH小于1, 表现为弱的负协同作用。 弹性散射荧光法得到的Gli-BSA体系的结合常数均比传统荧光光谱法大, 表明以药物荧光变化为考察对象的研究更准确、 合理, 并通过紫外光谱法对其所得结果的合理性进行了验证。 结果表明: 传统荧光光谱法利用蛋白为研究对象, 研究药物与蛋白之间的相互作用存在一定的不足, 其谱图只能反映蛋白分子与药物相互作用的部分信息, 而弹性散射荧光法利用药物为研究对象, 能够更全面、 准确地表达药物与蛋白之间的作用信息。

用荧光光谱法研究了拜复乐(MXFX)与小牛胸腺DNA(ctDNA)之间的相互作用。在pH=7.4的Tris-HCl缓冲溶液中, MXFX的荧光激发峰和发射峰分别位于291 nm和462 nm。ctDNA的加入对MXFX的荧光有静态猝灭作用, 这种荧光静态猝灭作用是由ctDNA和MXFX结合引起的, 作用力为氢键或范德华力, 结合常数为1.28×105 L/mol(25 ℃)。采用离子强度的影响、碘离子猝灭及溴乙锭竞争作用实验研究了MXFX与ctDNA间的相互作用, 结果表明MXFX与DNA的结合是MXFX嵌入到DNA中相邻2个碱基对之间, 属于嵌入结合模式。

为解决经典荧光光谱法在研究药物与蛋白结合机理中存在的缺陷, 以蛋白与兽用药氟洛芬(FF)的结合为例, 在生理条件(pH=7.40 的Tris-HCl缓冲溶液)下, 以氟洛芬为荧光检测对象、牛血清白蛋白(BSA)为猝灭剂, 通过改进荧光研究方法研究了药物与蛋白结合机理。结果表明, FF与BSA之间发生了静态猝灭, 主要通过静电引力结合, 其结合位点数约为1, Hill系数nH略大于1, 表现为弱的正协同作用。同时运用紫外吸收光谱法对该方法进行了验证, 表明改进荧光法能更准确和全面地表征蛋白和药物的相互作用。

在pH=7.40 的Tris-HCl缓冲溶液中, 牛血清白蛋白(BSA)与格列吡嗪(Glipizide)的相互作用会使BSA荧光有规律地发生猝灭, 据此建立了以BSA为探针的Glipizide含量测定方法。Glipizide浓度在0.25~20 μmol/L范围内与荧光强度呈现良好的线性关系, 方法的检出限为0.071 μmol/L。对于片剂中Glipizide含量的测定, 平行6次测定的相对标准偏差为1.29%~2.80%, 回收率为86.79%~96.43%。

以抗生素药物头孢匹胺钠(CPMS)为例, 在模拟人体生理条件下, 研究了不同温度下牛血清白蛋白(BSA)与CPMS的相互作用。由该反应的结合常数及结合位点数建立了预测该药物血浆蛋白结合率的理论模型, 由实验数据分析了CPMS浓度与BSA浓度动态变化时药物蛋白结合率的全程规律。研究结果表明, 药物与蛋白结合率随蛋白质与药物浓度的改变处于动态变化中。根据文献报道的药物与蛋白反应的结合常数及结合位点数预测了药物血浆蛋白结合率, 并与文献数据进行了比较, 结果满意。