1 河北大学 化学与环境科学学院，河北 保定 071002
2 河北省分析科学技术重点实验室，河北 保定 071002
3 国家级化学实验教学示范中心，河北 保定 071002
在模拟生理学条件下(pH=7.40)，采用同步荧光法研究了头孢西丁钠(CFXS)和溶菌酶(LYSO)中的荧光基团酪氨酸(Tyr)残基、色氨酸(Trp)残基之间的相互作用。结果表明：CFXS以静态猝灭的方式猝灭LYSO中的Tyr、Trp残基的荧光，结合位点数n ≈1。310 K时，Tyr与Trp残基反应的荧光猝灭比率分数NSFQR(Trp)(60.25%)>NSFQR(Tyr)(39.75%)，结合位置更靠近Trp残基。Hill系数nH约为1，表明CFXS与LYSO中Tyr与Trp残基的结合不会影响后继配体与蛋白质的结合。CFXS与LYSO中Tyr残基的药物结合率W(Q)为0.19%~0.13%，Trp残基的药物结合率W(Q)为0.23%~0.14%，游离的药物含量几乎不变，这表明CFXS与LYSO中Tyr与Trp残基的结合基本不影响药物的疗效。Tyr残基的蛋白结合率W(B)为52.69%~54.67%，Trp残基的蛋白结合率W(B)为67.67%~69.39%，因此，蛋白中游离的氨基酸残基数目会明显降低。CFXS-LYSO结合体系的主要作用力类型是疏水作用，分子对接结果表明CFXS与LYSO之间还存在氢键作用，且两者的最佳结合位置在LYSO的活性中心附近，两者的结合改变了活性中心处氨基酸残基的微环境。
同步荧光法 头孢西丁钠 溶菌酶 荧光基团 分子对接 synchronous fluorescence cefoxitin sodium lysozyme fluorescent group molecular docking
河北大学化学与环境学院 河北省分析科学技术重点实验室, 河北 保定 071002
以同步荧光法研究了298, 310, 318 K下硝苯地平(NDP)与胃蛋白酶(PEP)的荧光基团酪氨酸残基(P-Tyr)、色氨酸残基(P-Trp)之间的相互作用。表明药物以动态猝灭的方式猝灭P-Tyr、P-Trp的荧光, 结合位点数n为1, 主要作用力是疏水作用。310 K时NDP与PEP氨基酸残基反应的荧光猝灭比率份数P-Trp 53.43%>P-Tyr 46.57%, 结合位置更靠近P-Trp, NDP与蛋白结合率P-Tyr: 69.43%~87.15%, P-Trp: 73.64%~90.60%, 分别建立了结合模型。且Hill系数nH约为1, 该结合与后继配体无协同作用。结合距离r都小于7 nm, 则NDP与P-Tyr、P-Trp之间都存在非辐射能量转移。
同步荧光法 硝苯地平 胃蛋白酶 氨基酸残基 作用机制 synchronous fluorometry nifedipine pepsin amino acid residues interaction mechanism
1 新疆医科大学中心实验室, 新疆 乌鲁木齐 830011
2 新疆医科大学药学院, 新疆 乌鲁木齐 830011
3 新疆埃乐欣药业有限公司, 新疆 乌鲁木齐 830000
运用荧光光谱和同步荧光光谱法, 研究在pH 740的Tris-HCI缓冲体系下, 蒜氨酸与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)的相互作用。 采用荧光分光光度计, 以280 nm为激发波长, 扫描300～500 nm范围的荧光发射光谱; 分别设置波长差Δλ=15 nm和Δλ=60 nm扫描同步荧光光谱图; 用Stem-Volmer和Lineweaver-Burk方程及热力学方程处理数据。 荧光光谱法结果表明蒜氨酸能猝灭BSA及HAS的荧光; 得到蒜氨酸与BSA反应的结合常数在298和310 K时分别981×102和615×102 L·mol-1; 与HSA反应的结合常数在298和310 K时分别221×102和684×102 L·mol-1; 蒜氨酸与两种蛋白的反应均为自发进行; 与BSA的作用力为静电作用而与HSA的作用为疏水作用力; 同步荧光光谱表明, 蒜氨酸与BSA作用过程中主要影响酪氨酸残基, 对HSA中的两种氨基酸残基均有影响。 实验结果为研究蒜氨酸与生物小分子物质相互作用的机制提供了一定的理论依据。
蒜氨酸 牛血清白蛋白 人血清白蛋白 荧光光谱法 同步荧光法 Alliin BSA HSA Fluorescent spectrometry Synchronous flnorescence spectrometry 光谱学与光谱分析
2017, 37(6): 1826
长江大学 油气资源与勘探技术教育部重点实验室, 湖北 荆州 434023
十二烷基苯磺酸钠(SDBS)与十二烷基苯磺酸钠(SDS)之间的相互作用, 能对SDBS的检测产生明显干扰。实验结果表明, 在水溶液中SDS不仅可以增大SDBS的同步荧光强度, 还能显著降低SDBS的表观临界胶束浓度。按SDBS的摩尔计量比加入1∶1的羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD), 可以消除SDS对SDBS的同步荧光强度的干扰。相比于形成胶束, 在SDS/SDBS水溶液中, SDBS单体优先选择与HP-β-CD形成量比1∶1的包结物。当水溶液中HP-β-CD的浓度由0增加至0.900 mmol·L-1时, 复配体系中SDBS形成胶束的标准摩尔吉布斯函变ΔγGθm由-39.681 kJ·mol-1增加至-37.580 kJ·mol-1。加入适量HP-β-CD后, 能够准确检测SDS/SDBS水溶液中SDBS的含量(临盘采油厂T5站地层水样), 方法的回收率为101.0%~ 101.6%。FT-IR及1H-NMR分析表明, SDBS分子进入HP-β-CD分子内腔的大口径端并形成量比1∶1的包结物, 是消除SDS对SDBS检测干扰的根本原因
SDS/SDBS复配体系 羟丙基-β-环糊精 胶束 同步荧光法 干扰 SDS and SDBS complex HP-β-cyclodextrin micelle synchronous fluorescence spectrometry interference
河北大学化学与环境科学学院 河北省分析科学技术重点实验室, 河北 保定 071002
在模拟人体生理环境下, 利用荧光猝灭法(FQS)、同步荧光法(SYS)、共振光散射法(RLS)及紫外吸收光谱法(UV)分别研究了298 K下牛血清白蛋白与硫酸粘杆菌素、硫酸头孢匹罗、头孢匹胺钠3种药物间的相互作用机理。结果表明: 对于相同的体系, 利用4种方法计算得到的结合常数在同一数量级, 猝灭方式均为生成新物质的静态猝灭, 药物与蛋白作用时均以1∶1的比例结合, Hill系数近似。但对4种方法所得实验数据的综合比较表明, FQS、SYS更适合用于研究蛋白与药物的反应机理。
牛血清白蛋白 荧光猝灭法 同步荧光法 共振光散射法 紫外吸收光谱法 bovine serum albumin fluorescence quenching spectroscopy synchronous fluorescence spectroscopy resonance light scattering spectroscopy UV-Vis absorption spectroscopy
河北大学化学与环境科学学院 河北省分析科学技术重点实验室, 河北 保定 071002
利用荧光猝灭法和同步荧光法进行了盐酸吡格列酮(PGH)与牛血清白蛋白(BSA)之间反应机理的比较研究.结果表明：两种方法在研究PGH-BSA体系的猝灭类型、结合常数、结合位置、作用力类型、协同性及能量转移距离等方面,得到了相同的结果,表明同步荧光光谱法可以用于药物与蛋白反应机理的研究.
荧光猝灭法 同步荧光法 盐酸吡格列酮 牛血清白蛋白 反应机理 fluorescence spectroscopy synchronous fluorescence spectroscopy pioglitazone hydrochloride bovine serum albumin reaction mechanism
1 厦门大学化学化工学院化学系与现代分析科学重点实验室, 福建 厦门361005
2 厦门市疾病预防控制中心, 福建 厦门361021
微波具有萃取效率高、 加热均匀、 节省时间等特点, 而恒能量同步荧光法应用于多环芳烃的检测可提高选择性, 导数技术又能放大窄带灵敏度, 抑制宽带, 改善分辨能力。 本文结合恒能量同步荧光扫描技术与导数技术, 采用家用微波炉, 建立了食品中苯并(α)芘(BaP)的微波辅助萃取-二阶导数恒能量同步荧光法。 探讨了影响微波萃取效率的主要因素, 如萃取溶剂的类型及使用量、 微波萃取时间及冷却时间、 微波辐射功率等, 并与超声萃取做了比较。 对低脂肪样品直接用混合溶剂微波萃取即可进行光谱扫描检测食品中的BaP; 对高脂肪样品将皂化和微波辅助萃取这两步操作同时进行, 简化操作步骤, 缩短样品的前处理时间, 使样品的整个分析过程可在1 h内完成。 该方法操作简单、 快速、 费用低廉, 已应用于实际样检测, 低脂肪样品的加标回收率为900%～1050%, 高脂肪样品的为833%～946%, 方法重现性好, 结果令人满意。
食品 微波萃取 苯并(α)芘 二阶导数-恒能量同步荧光法 Food Microwave-assisted extraction Benzo(α)pyrene Second derivative constant-energy synchronous fluo
1 厦门大学化学化工学院化学系与现代分析科学重点实验室, 福建 厦门361005
2 厦门疾病预防与控制中心, 福建 厦门361021
采用具有高分辨、 高灵敏度的导数-恒能量同步荧光法分析测定了不同条件下, 纸杯中残留苯并(a)芘在水性模拟液和脂肪模拟液中的迁移量。 探讨了模拟物的种类、 浸泡时间和温度对纸杯中苯并(a)芘的相对迁移率的影响。 结果表明: 该分析方法的回收率为89.2%～104.3%; 纸杯中残留苯并(a)芘在脂肪模拟液中的相对迁移率明显高于水性模拟液的, 纸杯盛装冷水时无苯并(a)芘浸出, 而用于盛装热水可浸出苯并(a)芘; 温度越高, 浸泡时间越长, 纸杯中苯并(a)芘向食品模拟液的相对迁移率也越大。
纸杯 苯并(a)芘 食品模拟液 相对迁移率 导数-恒能量同步荧光法 Paper cups Benzo(a) pyrene Food simulants Relative migration percent(%) Derivative constant-energy synchronous fluorescenc
1 厦门大学化学化工学院,现代分析科学教育部重点实验室, 福建 厦门 361005
2 厦门市疾病预防控制中心, 福建 厦门 361021
恒能量同步荧光法应用于多环芳烃的检测可以提高选择性，低温可使谱带呈指纹特征，提供常温光谱无法获得的光谱细节信息，有助于实现对复杂基体中多环芳烃的检测。文章结合恒能量同步荧光扫描技术与斯波斯基低温技术，建立了食品中多种多环芳烃的低温恒能量同步荧光同时快速分析方法。对低油脂样品直接用正辛烷浸泡，高油脂样品也只需要增加皂化萃取，即可进行光谱扫描来检测食品样中的多种多环芳烃。对两种类型的实际样进行加标回收实验，回收率为80.2％～98.9％，定量工作曲线线性较好(r≥0.9938)。该方法选择性好、操作简便快捷、费用低廉。
食品 低温恒能量同步荧光法 多环芳烃 Food Low-temperature constant-energy synchronous fluore PAHs 光谱学与光谱分析
2009, 29(10): 2806
