基于羧基量子点的荧光猝灭效应,提出了一种检测神经生长因子(NGF)的新方法。研究结果表明,在pH7.5的缓冲溶液中,NGF抗原与羧基量子点标记的NGF抗体发生特异性结合,能使羧基量子点的荧光发生猝灭。在1~20 ng·mL ^-1范围内,荧光猝灭程度与NGF抗原质量浓度呈良好的线性关系,线性系数为0.9696,检测下限为1 ng·mL ^-1。所提检测方法具有良好的抗干扰特性,在诊断检测方面具有巨大的应用潜力。

建立FOS-μSIA-LOV光谱在线过程分析, 实现自动化含量测定头孢拉定(RAD)。 通过程序编写, 元件智能控制, 优化实验条件, 考察了RAD中的辅料, 载液, 进样体积等因素。 优选条件为: 载液吸入体积为500 μL; RAD吸入体积为100 μL; 打出体积的流速为150 μL·s-1, RAD质量浓度c与ΔF的线性关系为ΔF=812.6c+284（0.05～0.5mg·mL-1, r=0.999 5）, RSD为4.4%, 回收率为101%～103%。 通过FOS-μSIA-LOV系统和设定特定检测程序, 实现自动化在线过程分析, 具有重现性好、 节约试剂、 省时省力的优点。

基于平行因子(PARAFAC)分析的激光诱导纳秒时间分辨荧光(LITRF)猝灭法原位研究典型多环芳烃(PAHs)芘(Pyr)和菲(Phe)单独及混合状态下与Aldrich腐植酸(HA)相互作用。 实验表明, 在266 nm激发波长下, Pyr, Phe及HA三者的LITRF光谱相互重叠, 无法直接同时测定混合组分中游离Pyr和Phe荧光强度。 利用PARAFAC分析可快速有效消除HA荧光干扰, 获取混合溶液LITRF光谱中Pyr和Phe荧光强度及各自荧光衰减曲线, 并以Freundlich吸附等温模型描述PAHs与HA结合特性。 结果验证了Pyr和Phe与HA以非线性形式结合(n<1); Pyr和Phe共存时, 两者与HA结合存在竞争关系。 加入竞争吸附质后, Pyr和Phe与HA的吸附等温线非线性程度减弱(n趋近于1), 单点结合系数下降, 且竞争强度随竞争吸附质浓度增加而增强。 此外, LITFR-PARAFAC猝灭法与传统荧光猝灭法所得单组分Pyr和Phe与HA结合特性无显著差异。 猝灭速率常数及荧光寿命分析反映出Pyr和Phe与HA间荧光以静态猝灭形式为主。 LITFR-PARAFAC猝灭法可快速原位研究混合PAHs与HA相互作用, 有利于原位预测和评估PAHs的环境行为及其生态风险。

利用激光诱导纳秒时间分辨荧光(laser-induced nanosecond time-resolved fluorescence, LITRF)猝灭法原位研究腐植酸(humic acid, HA)分别与母环多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)菲(phenanthrene, Phe)及烷基PAHs 9-乙基菲(9-Ethylphenanthrene, 9-EP)和惹稀(retene, Ret)相互作用, 考察HA对母环及烷基PAHs结合特性差异与机制, 对了解PAHs环境行为及生物有效性有重要意义。 结果表明, 通过改变延迟时间(50 ns)可有效消除HA荧光干扰, 实现游离Phe, 9-EP及Ret浓度直接测定。 利用Freundlich非线性等温吸附模型描述Phe, 9-EP和Ret与HA结合特性, LITRF猝灭法与传统荧光法获得的模型拟合参数及单点结合系数结果一致。 其中, 参数n小于1, 表明Phe, 9-EP及Ret与HA均以非线性形式结合, 且9-EP和Ret非线性程度高于Phe; 相同给定平衡浓度下, HA与9-EP和Ret单点结合系数KOC大于Phe, 而9-EP和Ret结合能力相近, 且PAHs与HA结合系数均随给定浓度增加而降低。 疏水性、 取代基及与HA疏水空腔适应能力决定特定PAHs与HA结合特性。 通过荧光寿命分析, HA存在下Phe, 9-EP和Ret寿命分别为36.90, 35.34和35.13 ns, 与未加入HA时的36.36, 35.34和35.84 ns无明显差异, 表明Phe, 9-EP和Ret与HA间的荧光猝灭以静态过程为主。 LITRF猝灭法可快速有效原位研究PAHs与HA相互作用, 有助于实现PAHs生态风险原位评估。

在pH 7.40缓冲溶液条件下, 以牛血清白蛋白(BSA)为检测对象, 利用共振光散射法分别研究了298, 310, 318 K三个温度下BSA和硫酸粘杆菌素(CS)之间的相互作用机理。 结果证明: 该体系在反应过程中, 主要的猝灭方式为生成新物质的静态猝灭; n值约为1, 表明CS与BSA发生作用时只有一个结合位点; 由热力学参数得知该体系的反应过程是自发进行的, 药物与蛋白质主要是通过静电力结合; Hill系数约等于1, 表现为零协同作用。 将所得实验数据与荧光猝灭法所得数据进行比较, 比较显示: 利用共振光散射法所计算的猝灭参数(Ksv, Kq, n, Ka)与荧光猝灭法所得猝灭参数数值相似, 猝灭结论一致, 验证了该方法的正确性, 说明共振光散射法用于研究蛋白质与药物的相互作用是可行的。 共振光散射法与检测物质本身有无内源荧光无关, 因此也可以用于没有内源荧光物质的研究, 这使小分子与蛋白质相互作用的研究方法得到拓宽。

在模拟人体生理环境下, 利用荧光猝灭法(FQS)、同步荧光法(SYS)、共振光散射法(RLS)及紫外吸收光谱法(UV)分别研究了298 K下牛血清白蛋白与硫酸粘杆菌素、硫酸头孢匹罗、头孢匹胺钠3种药物间的相互作用机理。结果表明: 对于相同的体系, 利用4种方法计算得到的结合常数在同一数量级, 猝灭方式均为生成新物质的静态猝灭, 药物与蛋白作用时均以1∶1的比例结合, Hill系数近似。但对4种方法所得实验数据的综合比较表明, FQS、SYS更适合用于研究蛋白与药物的反应机理。

利用荧光猝灭法和同步荧光法进行了盐酸吡格列酮(PGH)与牛血清白蛋白(BSA)之间反应机理的比较研究.结果表明：两种方法在研究PGH-BSA体系的猝灭类型、结合常数、结合位置、作用力类型、协同性及能量转移距离等方面,得到了相同的结果,表明同步荧光光谱法可以用于药物与蛋白反应机理的研究.

以壳聚糖包覆的CdTe量子点为荧光探针， 基于荧光猝灭法建立了吉米沙星定量测定方法。 结果表明， 体系的荧光强度与吉米沙星浓度在3.46×10－9～3.46×10－7 g·L-1范围内呈良好的线性关系(r=0.999　2)， 线性回归方程为F0/F=1.063　7+0.016　7c(g·L-1)。 对2.77×10－7 g·L-1吉米沙星溶液进行7次平行测定的相对标准偏差为2.7%，基于荧光猝灭法相关理论证明了该相互作用过程为静态猝灭。 本方法灵敏度高， 检测线性范围宽， 为吉米沙星定量测定提供了简便可靠的方法。

四苯硼钠对罗丹明B具有荧光猝灭作用, 使荧光信号强度减弱甚至消失, 而盐酸西替利嗪对罗丹明B-四苯硼钠体系具有反猝灭作用, 又能使该体系荧光信号增强, 且荧光信号增强程度与药物浓度成线性关系。 该文以491 nm为激发波长, 以610 nm作发射波长, 测量空白液与试液荧光强度之差ΔF=F1-F0, 根据ΔF值与溶液中的盐酸西替利嗪浓度呈正比关系, 建立了一种反荧光猝灭测定盐酸西替利嗪新方法, 该方法线性回归方程为ΔF=0.727 5ｃm-2.357, 相关系数R为0.997 2, 线性范围3.50～129.3 mg·L-1, 检出限为1.05 mg·L-1, 方法RSD为1.2%。 用本方法对不同厂家生产的盐酸西替利嗪片以及盐酸西替利嗪胶囊样品进行测定, 测定值与药品标示量基本相符, 加标回收率在92%～106%之间。

修饰试剂对量子点的合成、 性质具有重要的影响, 但目前有关修饰试剂对量子点与蛋白质间相互作用的影响尚不清楚。 采用紫外-可见吸收光谱、 荧光光谱及红外光谱研究了3种巯基化合物(巯基乙酸, TGA; L-半胱氨酸, L-Cys; 还原型谷胱甘肽, GSH)修饰的CdTe量子点与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。 通过Stern-Volmer方程对数据进行了分析, 得到了不同CdTe量子点与BSA相互作用过程的ΔHθ, ΔGθ和ΔSθ, 并比较了CdTe量子点的不同修饰剂对BSA荧光猝灭的影响。 研究结果表明, 3种修饰试剂包覆的CdTe量子点与BSA的相互作用均为静态猝灭过程, 猝灭常数KSV(L-Cys)>KSV(TGA)≈KSV(GSH); TGA和L-Cys修饰的CdTe量子点与BSA的结合力主要为疏水作用力, 而GSH修饰的量子点与其结合力既有氢键作用力又有疏水作用力; 这些结果说明量子点与BSA的作用过程与量子点表面修饰试剂的类型有关。