目的: 探讨脑内铜稳态与γ-氨基丁酸、谷氨酸含量之间的关联性, 了解脑内铜代谢参与神经疾病的作用机制。方法: 把实验动物分为8组: 对照组, 戊巴比妥组, 腹腔注射CuCl2组(剂量分别为2 mg/kg、10 mg/kg、50 mg/kg), CuCl2--戊巴比妥混合组(先腹腔注射CuCl2 , 再注射戊巴比妥)。检测SD鼠血清和海马内不同形态铜、γ-氨基丁酸和谷氨酸含量。结果: 单一铜胁迫下发现随着外源铜升高血清和海马总铜及血清非蛋白结合铜和海马内谷氨酸含量显著升高, 在50 mg/kg注射剂量下达到最高(P＜0.02); 海马非蛋白结合铜和神经递质γ-氨基丁酸含量在2 mg/kg注射剂量下达到最高(P＜0.02), 并随着外源铜浓度升高而降低。单一注射戊巴比妥后海马游离铜含量明显降低(P＜0.02)。铜胁迫1小时后注射1%戊巴比妥结果表明, 戊巴比妥能明显降低铜胁迫下海马及血清总铜和游离铜含量(P＜0.05)。结论: 外源铜能改变体内铜稳态; 铜稳态失衡导致神经递质γ-氨基丁酸、谷氨酸含量变化, γ-氨基丁酸含量与非蛋白结合铜呈正相关。

大型仪器设备是高校科研的重要硬件条件.本文从我校以往大型精密仪器使用的情况和存在的问题入手,分析中小规模大学的大型精密仪器共享平台建立的优势,探讨了中小规模大学建立大型精密仪器共享平台-中心实验室的现实意义.

为评估小鼠巨噬细胞吞噬死亡细胞时胞质内游离钙离子的变化.实验使用Fluo-3标记巨噬细胞内钙离子和碘化丙碇对死亡细胞核染色,观察吞噬过程中细胞内钙离子的变化和显示巨噬细胞的吞噬功能,检测含死亡细胞的巨噬细胞内荧光密度图像.利用激光扫描共聚焦显微镜检测钙离子的释放.在缺钙的溶液中,可见巨噬细胞接触死细胞时细胞内钙离子快速地聚集和增高.在吞噬体形成时,巨噬细胞内钙离子上升到较高的水平.快速上升后,当吞噬小泡消化时,细胞内游离钙下降,随后钙离子恢复到低水平.研究显示伴随着吞噬小泡中红色荧光的死细胞的出现和消失,巨噬细胞内出现一系列钙离子变化的图像.提示巨噬细胞内钙离子改变在细胞吞噬作用中具有一定的作用.

为了研究食管永生化细胞在不同的培养基中,培养后细胞形态的改变.实验利用显微镜观察,鬼笔环肽(phalloidin)-FITC标记和流式细胞仪技术分析转换培养基与未转换培养基的SHEE细胞.结果显示:转换培养基后,SHEE细胞膜边缘异常,细胞连接松散;细胞内F-actin含量降低.说明细胞培养过程中,更换细胞生长环境可影响到细胞骨架,进而改变细胞形态及细胞的粘附能力.

目的:为探讨癌细胞内F-actin的解聚与聚合对癌细胞的形态、迁移、侵入的影响.方法:利用激光共聚焦显微镜对贴附培养的人肝癌Bel-7402细胞形态及其细胞内F-actin进行观察;使用流式细胞仪对贴附的Bel-7402细胞及其脱落细胞与Cyt-B处理后Bel-7402细胞内F-actin的含量进行分析.结果:Bel-7402细胞在培养的过程中,癌细胞形态伸展,出现侵入性生长,细胞内F-actin聚合形成粗大的贯通细胞内的F-actin束,F-actin含量增高;癌细胞在生长过程中,常出现重叠生长,细胞变圆,F-actin解聚变短,F-actin小体增高,细胞有脱落的趋势,其脱落细胞内的F-actin含量低于贴附细胞.结论:人肝癌Bel-7402细胞内F-actin的聚合可增加癌细胞的贴附和侵入性;细胞内F-actin的解聚,及G-actin重新聚合形成F-actin小体可影响到癌细胞脱落及迁移.

癌细胞的形态及癌细胞的生物学行为(如粘附、迁移和浸润)与细胞内骨架系统密切相关, 本研究利用Phalloidin-FITC标记人肝癌Bel-7402细胞内F-肌动蛋白(F-actin), 使用激光扫描共聚焦显微镜观测细胞微丝骨架与癌细胞形态的关系, 及Cyt-B处理Bel-7402细胞后,癌细胞内微丝骨架的变化.结果显示:癌细胞内F-actin解聚,F-actin小体的聚集重组是癌细胞的形态变化的主要因素之一.

目的:Microsoft Excel 的内置控制语言是VBA (visual basic for application).它可以极大地增强Excel的数据处理能力.本文通过一个简单的例子说明如何利用VBA自动分析大量共聚焦线扫描图像数据并图示分析结果.方法与结果:文中首先描述了取自共聚焦线扫描图像的实验数据的结构及处理要求.然后具体说明宏程序(用VBA编写)的录制、修改和使用的详细方法.宏程序代码很接近自然语言,较好理解,而且在大多数情况下可通过"录制宏"功能自动生成,把编程的工作减至最少.结论:与手工使用Excel一步步进行数据处理相比,使用Excel中的VBA处理数据可少花时间、少犯错误、减少大量单调重复的劳动.这些可极大地提高数据处理效率,使研究者可把更?嗟氖奔溆糜谑荽矸桨傅纳杓坪屯晟粕?特别在处理量大而复杂的实验数据时更需要如此.这样,数据中蕴含的有用信息才能更好地被有效而准确地提取出来并加以显示.

目的: 游离钙离子参与机体的多种重要生理功能.本研究着重探讨如何利用激光共聚焦显微镜线扫描成像技术同时记录正常情况下心肌细胞的钙瞬变以及由此引起的细胞收缩过程.方法与结果: 本研究以分离的心室肌细胞为对象,通过局部场刺激诱发细胞的钙瞬变和收缩,同时配合使用激光共聚焦显微镜成像系统,以线扫描方式记录实验结果.结果表明,钙瞬变先于细胞收缩发生(约早31 ms),而收缩最大处远落后于钙瞬变峰值发生处(约慢346 ms).结论: 激光共聚焦显微镜线扫描成像技术?哂薪虾玫氖奔浞直媛屎涂占浞直媛?其实验结果直观、明确、可靠,是较理想的研究钙瞬变和细胞收缩的光学记录方法.

目的:为了更直观地观察和显示呼吸窘迫综合症(acute respiratory distress syndrom,ARDS)典型的病理变化(肺泡内形成一层蛋白质透明膜).方法: 利用百草枯(Paraqual)染毒SD大鼠复制ARDS实验动物模型,取肺病理组织,切片, 试剂Goat-Anti-Rat-FITC IgM+IgG染色,共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scarming microscope,CLSM)观察.结果: CLSM能清晰到样品内不同层面的病理变化.结论:共聚焦激光扫描显微镜能清晰观察样品内?煌忝娴慕峁? 相比于传统的光学显微镜,其观察到的图像更直观、更具立体感,能更好表达ARDS的病理变化特征.

探讨膀胱癌细胞纤维肌动蛋白(F-actin)的空间结构.采用共聚焦激光扫描显微镜光学切片技术结合异硫酸氢荧光素-鬼笔环肽(FITC-phalloidin)标记纤维肌动蛋白和碘化丙啶(PI)标记核酸的荧光探针双重标记技术对膀胱癌细胞纤维肌动蛋白进行形态学观察,结果可见膀胱癌细胞内纤维肌动蛋白微丝形态完整,成细束或细丝状,平行排列贯穿于整个细胞或细胞突起,在胞质边缘处较密集.